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轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒灥男?/h1>
更新時間:2022-11-30      點擊次數(shù):1175
  轉(zhuǎn)染是一種將外來顆粒和核酸轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中的技術(shù),它可以通過化學(xué)的方式來實現(xiàn)。轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒灥男剩瑥亩梢栽趹?yīng)用基因和基因組令人難以置信的功能領(lǐng)域進(jìn)行大量研究。在所有轉(zhuǎn)染實驗中,轉(zhuǎn)染方式的選擇尤為重要。
  陽離子聚合物與帶負(fù)電荷的核酸序列結(jié)合,帶正電荷的復(fù)合物被細(xì)胞膜吸引并通過內(nèi)吞作用整合到宿主細(xì)胞中。此類試劑包括PLGA(聚乳酸-乙醇酸共聚物),一種可安全用于轉(zhuǎn)染程序的食品級聚合物,以及PBAE(聚-β-氨基酯),一種能夠保護(hù)DNA分子的聚合物在宿主細(xì)胞內(nèi)遞送。這些從PLGA(聚乳酸-乙醇酸共聚物)和PBAE(聚-β-氨基酯)獲得的聚合物可用于將DNA構(gòu)建體安全有效地輸送到培養(yǎng)細(xì)胞中。許多基于聚乙烯亞胺的聚合物,并用于多種哺乳動物細(xì)胞系以及昆蟲和細(xì)菌細(xì)胞中進(jìn)行瞬時和穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染。基于聚乙烯亞胺的聚合物可用于培養(yǎng)神經(jīng)元細(xì)胞。成熟的神經(jīng)元由于不經(jīng)歷細(xì)胞分裂,所以神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)物較難培養(yǎng)。雖然細(xì)胞分裂的缺乏可以通過腫瘤性、永生化的神經(jīng)細(xì)胞來克服,但由于癌性神經(jīng)元和普通神經(jīng)元細(xì)胞之間存在著重大差異。所以只能通過基于聚乙烯亞胺的聚合物涂層來抑制神經(jīng)元細(xì)胞退化。
  納米顆粒是由無機(jī)和有機(jī)顆粒和聚合物組成的非病毒載體,可用于基因傳遞,避免使用天然生物聚合物(如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和糖)時的毒性和相容性問題。這些載體確保基因遞送到特定細(xì)胞或特定組織中,用于基因治療。
  聚乙烯亞胺和三聚磷酸鹽組成的納米顆粒多數(shù)是通過冷凍干燥法。科學(xué)家們使用納米粒子將siRNA和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到癌細(xì)胞系和原代細(xì)胞培養(yǎng)物中。大多數(shù)DNA轉(zhuǎn)染試劑與對血清敏感的siRNA不相容,因此納米顆粒在RNAi轉(zhuǎn)染中起著至關(guān)重要的作用。

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