亚洲av精品一区二区三区,婷婷97狠狠成人网站,国产香蕉尹人视频在线,香蕉欧美成人精品A∨在线观看

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術有限公司網站!
咨詢熱線

18616108315

當前位置:首頁 > 技術文章 > 活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

更新時間:2024-08-09      點擊次數:1016

ROS也叫活性氧(reactive oxygen species)是細胞內產生的一種具有氧化活性的化學物質,包括過氧化氫、超氧陰離子等。ROS在正常生理條件下也會產生,但當其產生過多或清除不足時,會對細胞造成氧化應激,導致細胞損傷和疾病發(fā)生。

檢測原理

用于檢測細胞內ROS廣泛采用的方法是DCFH-DA熒光探針法。DCFH-DA(二氯熒光黃雙乙酸鹽)是一種可指示的探針,其本身不具有熒光,但可以自由穿過細胞膜。一旦進入細胞,它會被細胞內的酯酶水解成DCFH。由于DCFH無法穿過細胞膜,因此熒光探針會在細胞內積聚。細胞內的ROS能夠氧化無熒光的DCFH,生成有熒光的DCF,且熒光強度與ROS水平成正比。通過熒光顯微鏡、流式細胞儀或激光共聚焦顯微鏡等設備,在最大激發(fā)波長480nm和最大發(fā)射波長525nm下檢測熒光

檢測步驟

一、裝載探針

刺激時間較短(通常為2 h以內)的細胞:先裝載探針,后用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞。

刺激時間較長(通常為6 h以上)的細胞:先用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞,后裝載探針。

1、原位裝載探針(僅適用于貼壁細胞)

活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

2、收集細胞后裝載探針(適用于貼壁細胞和懸浮細胞)

活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

二、檢測

原位裝載探針法:激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。

收集細胞后裝載探針:用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測,也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。

注意事項

① 探針裝載后,一定要洗凈殘余的未進入細胞內的探針,否則會導致背景較高。

② 探針裝載完畢并洗凈殘余探針后,可以進行激發(fā)波長的掃描和發(fā)射波長的掃描,以確認探針的裝載情況是否

良好。

③ 盡量縮短探針裝載后到測定所用的時間(刺激時間除外),以減少各種可能的誤差。

④ 根據結果顯示的整體熒光強度的高低,可以適當調整DCFH-DA探針的稀釋倍數以及孵育時間。


微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
在闺房里被强高h| 军人边走边吮她的花蒂| 亚洲精品亚洲人成人网| 妈妈的朋友中文字幕| 超碰97久久国产精品牛牛| 亚洲欧美综合区自拍另类| 欧美国产成人精品一区二区三区| 久久日本片精品AAAAA国产| 久久久精品波多野结衣AV| a级国产乱理伦片在线观看| 久久精品国产亚洲7777| 日日噜噜夜夜狠狠久久丁香五月 | 亚洲国产精品无码久久青草| 两个人看的www视频免费完整版| 《与上司出轨的人妻》| 婬荡少妇21p| 国产精品久久久久精品艾秋| 厨房一次又一次的索要| 久久久人人人婷婷色东京热| 白嫩少妇激情无码| hd女人奶水授乳milk| 欧美性xxxxx极品老少| 老狼影院成年女人大片| 麻豆蜜桃69无码专区在线| 少妇又爽又刺激视频| 欧美xxxx黑人又粗又长精品| 从头啪到尾全肉小黄书小说 | 极品妇女扒开粉嫩小泬| 国产一区二区三区在线观看免费| 适合女士自慰时看的黄文| 国产精品日日做人人爱| 销魂美女图库| 国产无遮挡又黄又爽在线观看 | 精品乱码一区二区三四区视频| 性xxxxxx中国寡妇mm| 少妇被又大又粗又爽毛片久久黑人| 银杏视频在线观看www| 国产熟妇高潮叫床视频播放| 无码人妻一区二区三区在线 | 和50岁熟妇做了四次| 亚洲精品无码MV在线观看网站|