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帶你了解細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒的知識(shí)

更新時(shí)間:2021-04-19      點(diǎn)擊次數(shù):1357
  細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。形態(tài)學(xué)檢測(cè)是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的,起初,細(xì)胞間連接和微絨毛消失,細(xì)胞體積縮小,胞漿凝縮,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合,形成一個(gè)個(gè)空泡,核糖體與線粒體等細(xì)胞器聚集,結(jié)構(gòu)尚無(wú)明顯改變,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細(xì)胞核固縮呈均一的致密物,進(jìn)而斷裂成碎塊,此時(shí)細(xì)胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個(gè)細(xì)胞變成數(shù)個(gè)大小不等的有膜包裹的凋亡小體:最后凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細(xì)胞吞噬、消化。上述這些形態(tài)學(xué)的變化,可以通過本試劑盒中的染色及光學(xué)顯微鏡觀察。
  細(xì)胞凋亡的一個(gè)顯著特點(diǎn)是細(xì)胞染色體DNA的降解,這是一個(gè)較普遍的現(xiàn)象。這種降解非常特異并有規(guī)律,所產(chǎn)生的不同長(zhǎng)度的DNA的片段約為180bp-200bp的整數(shù)倍,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)特異的梯狀Ladder圖譜,EZ640TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(遠(yuǎn)紅熒光)試劑盒采用TUNEL法,應(yīng)用末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)在凋亡細(xì)胞斷裂DNA的3´-OH末端催化摻入EZ640-dUTP。EZ640-dUTP標(biāo)記的DNA可以用熒光顯微鏡直接觀察或者用流式細(xì)胞儀定量。TUNEL法可以選擇性的檢測(cè)凋亡細(xì)胞,而非壞死細(xì)胞或因輻照和藥物治療而造成的DNA鏈斷裂的細(xì)胞。TUNEL實(shí)驗(yàn)中,TdT酶催化dUTP摻入斷裂的DNA鏈的3´-OH末端??乖瓨?biāo)記的dUTP(如digoxin-dUTP、生物素-dUTP),因?yàn)樗梢灾苯舆M(jìn)行原位檢測(cè),是一種更快速、直接的檢測(cè)手段。
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